▣ 재조합 항체 스크리닝 서비스의 장점과 차별성
- 세계적 규모의 재조합 항체 라이브러리 구축 및 보유 : clones
인간항체 (scFv) : 1.08 x 1011 clones
단일도메인 항체 (sdAb) : 5.02 x 1010 clones
펩타이드 압타머 (Peptide Aptamer) : 5.8 x 1010 (linear) & 7.3 x 1010 (circular) clones
- 초고속 항체 스크리닝 : "One Day One Panning" 전략으로 항원 수령에서 부터 항체 정제까지 단 15-25일 소요
- 다클론항체 제작 비용보다 저렴한 합리적 서비스 비용 : 200만원/항체
- 제작 기간과 서비스 비용을 고려한 다양한 서비스 옵션 : 베이직 vs. 풀 서비스와 공동연구개발 서비스
- 대장균을 이용한 다양한 형태의 항체 발현과 정제 : GB1 융합 & IgG Fc 융합 Minibody
▣ 재조합 항체 스크리닝 서비스 흐름도
▣ 항원 단백질
항원 단백질 (antigen) : 정제도 95% 이상의 단백질 (native 또는 denature 상태 모두 가능)로서 0.2 mg 이상이어야 하며 PBS 또는 Tris buffer에 용해되어 있고 0.1 ~ 1 mg/ml의 농도가 적합합니다. 항원으로 사용할 단백질 용액에는 SDS와 Triton X-100, Tween 20과 같은 계면활성제가 포함되어 있지 않아야 합니다.
*주의사항 : 단백질 이외의 항원으로서 펩타이드나 화학물질을 표적으로 하는 스크리닝 서비스는 준비중으로서 현재는 서비스가 불가합니다.
▣ 서비스 타임라인
항원 단백질 수령후 익일부터 3 ~5회의 바이오패닝을 4~7 일간 수행하고, 마지막 패닝이 끝난 후 ELISA를 수행하여 항체 스크리닝의 성패여부를 판단합니다. 그 결과는 문자 또는 메일로 고객에게 전달하며, 패닝이 성공으로 판단된 경우에는 바로 항체 발현 벡터에 서브클로닝을 하고 12 ~ 24개의 랜덤 클론들을 배양하여 ELISA 분석을 통해 최적의 후보 항체 클론들을 선별합니다. 이때 비특이적 결합 여부도 함께 확인합니다. 이 과정은 대략 3일 정도 소요됩니다.
마지막 패닝후 ELISA 분석에서 실패로 판정이 된 경우에는 고객과의 협의를 통해 스크리닝을 중단할지 또는 재개할지를 결정합니다.
서비스 옵션으로서 고객께서 Western blotting이 가능한 항체를 원하는 경우에는 추가로 7일간에 걸쳐 선별한 항체 후보 클론들을 대상으로 western 실험을 진행합니다.
이때까지의 모든 과정이 모두 끝나면, 확보한 항체 클론들 중에서 특성이 가장 좋은 하나를 선택하여 리터 규모로 배양하고 항체유전자를 발현한 후 정제하는 과정을 5-7일간 진행하게 됩니다.
이와 같이 정제한 항체는 최종적으로 ELISA 분석을 수행하여 QC를 하고 PBS/50% glycerol 용액에 1 mg/ml의 농도로 담아 고객에게 전달하게 됩니다.
▣ 항체 스크리닝 베이직 서비스 신청 방법
당사 홈페이지에서 온라인으로 신청 가능합니다. 신청 바로가기
또는 신청서를 다운받은 후 작성하여 이메일 (recombody@naver.com) 또는 팩스로 (042-581-8449) 보내주시면 됩니다. 서비스신청서 다운로드
항체의 종류로서 1) sdAb 또는 2) scFv를 체크해 주시고,
항체의 형태로서 1) No fusion (6xHis only) 2) GB1 fusion 3) human, mouse, rabbit IgGFc fusion 의 하나에 체크해 주시면 됩니다.
옵션으로서 Western blotting의 가능 유무를 기입해 주시면 됩니다.
주의 사항 :
1. 기본 ELISA 외에 Western blotting이 가능한 항체를 원하시는 경우에는 별도의 추가 서비스 비용이 발생하며 7일 정도의 기간이 더 소요됩니다. 또한 패닝 방법에서 차이가 있기 때문에 서비스 개시후에는 수정할 수 없습니다. 또한 항체의 기본 형태 (6xHis tag only와 GB1 fusion) 외에 IgG Fc fusion 형태를 선택하시는 경우에는 추가 비용이 발생합니다.
2. 베이직 서비스의 경우에는 사용할 수 있는 항원이 정제 단백질 (purified protein)로 제한 됩니다. 정제 순도가 90-95%로서 PBS 또는 Tris buffer에 있어야 하며 SDS, Tween20, Triton X-100과 같은 계면활성제를 포함하고 있지 않아야 합니다. 단백질은 0.1-1 mg/ml의 농도로 최소 0.2 mg을 제공해 주셔야 합니다.
3. 10일간의 일차 스크리닝이 실패로 판정이 난 경우엔 고객께 전화 또는 문자로 통보하여 상의한후 스크리닝을 재개할 지 또는 중단할지를 결정하게 됩니다.
4. 재조합 항체 스크리닝 서비스를 통해 제작한 항체가 모든 활용 영역에서 사용될 수 있는 것은 아닙니다. 보내주신 항원을 코팅하여 (coating)하여 direct ELISA를 통해 항체를 선별하기 때문에 기본적으론 ELISA 법에서는 작동을 하지만 기타의 실험들, 즉 Western blotting이나 Immunofluorescence, Immunoprecipitation 등과 같은 실험들에서 잘 작동하는 것을 보장하지는 않습니다. 개별적인 실험 방법들에서의 작동 유무와 상세 실험조건들은 고객께서 직접 실험하여 확인 하셔야 합니다.
5. 옵션으로서 Western 가능 항체를 선택하신 경우에, Western 확인은 보내주신 항원 0.1-1 ug을 사용하여 시행합니다. 정제된 단백질에서 western 결과가 잘 나왔다고 해서 고객께서 주로 사용하시는 생체시료에서도 결과가 잘 나올 것으로는 보장하지 않습니다. 이는 시료의 처리방법과 실험방법 그리고 시료내 포함된 타겟 단백질의 양에 따라 Western 실험의 검출한계가 달라지기 때문입니다.
6. 제작한 항체는 ELISA titer 1:5,000 이상의 특성을 가진 1개 클론을 기본적으로 제공합니다 (10 mg/ml PBS의 농도로 1시간 동안 37°C에서 코팅한 플레이트를 대상으로 direct ELISA를 했을 때).
7. 제작한 항체는 PBS/50% glycerol 용액에서 1 mg/ml의 농도로 1 mg을 납품합니다.
8. 기존에 상업적으로 사용하시던 항체와 비교하여 재조합 항체의 성능은 다를 수 있으며 고객께서는 이 내용을 사전에 충분히 검토하셔야 합니다.
9. 서비스 결제는 납품과 동시에 진행하셔야 하며 신청시에는 일체의 세팅 비용도 받질 않습니다.
10 . 베이직 서비스의 경우, 최종 항체 발현클론과 그 유전자 서열 정보는 제공하지 않으며 항체의 지적재산권은 당사에 있습니다.
▣ 항체 스크리닝 풀 서비스
항체 신약 발굴 또는 기타의 신기술 개발을 위해 다수의 항체 후보들과 해당 유전자 서열들이 필요한 경우에는 일반적인 항체 스크리닝 서비스와는 별도의 계약을 통해 서비스를 진행할 수 있습니다. 이때 소요되는 비용은 계약의 내용에 따라 달라질 수 있으며, 계약 내용에 따라서 지적재산권의 범위도 한정할 수 있습니다. 서비스 기간은 내용에 따라 달라지며 3개월 ~ 12개월입니다.
당사에서 항체 및 항체와 관련된 재료들을 제공하고 연구결과들과 그 결과물에 따른 저작물의 오써쉽과 지적재산권을 공유하는 공동연구 방식의 항체 스크리닝 서비스를 제공하고 있습니다. 비밀유지계약서와 양해각서에 상호 서명한 후, 당사자들간의 협의를 통해 항체 발굴을 개시하며 이때 필요한 제반 비용은 당사가 부담합니다. 대상은 개인 및 대학 연구실, 국가 연구기관 그리고 기업입니다.
▣ 항체 스크리닝 서비스 비교 요약
서비스 내용 |
항체 스크리닝 베이직 서비스 |
항체 스크리닝 풀 서비스 |
공동연구 방식의 항체 스크리닝 서비스 |
항체의 종류 |
scFv 또는 sdAb |
scFv 또는 sdAb |
scFv, sdAb, Peptide Aptamer |
| 항원의 종류 | Purified Protein | Purified Protein | Purified Protein, Whole Cell/Bacteria/Virus, Synthetic Peptide, Chemical |
| 서비스 기간 | 15-25 일 | 3 - 12 개월 | 완료시까지 |
제공 결과물 |
기본 1개 클론 항체 단백질 (1 mg) |
5개 클론 이상의 항체들과 해당 유전자 서열 제공 |
제한 없음 |
기본 비용 |
2,000,000 원 (VAT 별도) |
협의 사항 |
없음 |
추가 옵션 (Western blotting 가능) |
800,000 원 (VAT 별도) |
없음 |
없음 |
| 추가 옵션 (Minibody) | 500,000 원 (VAT 별도) | 없음 | 없음 |
| 항원 단백질의 정제 서비스 | 불가 | 협의 사항 (비용 발생) | 협의 사항 (비용이 발생할 수 있음) |
| 항체를 이용한 연구 결과물의 공유 | 해당 사항 없음 | 해당 사항 없음 | 필수 사항 (저작물의 오써쉽 공유 포함) |
항체 클론/서열 제공 및 지적재산권 | 항체 발현클론이나 서열정보는 제공하지 않음 지적재산권은 당사에 있음 | 고객 (계약 내용에 따라 달라질 수 있음) | 협의 사항 (기본 50:50) |